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線性和范圍
線性與范圍 (linearity and range) 分析方法的線性是在給定范圍內(nèi)獲取與樣品中供試物濃度成正比的試驗(yàn)結(jié)果的能力。換句話說(shuō)，就是供試物濃度的變化與試驗(yàn)結(jié)果(或測(cè)得的響應(yīng)信號(hào))成線性關(guān)系。 所謂線性范圍是指利用一種方法取得精密度、準(zhǔn)確度均符合要求的試驗(yàn)結(jié)果，而且成線性的供試物濃度的變化范圍，其最大量與最小量之間的間隔，可用mg/L ~ mg/L、 ug/ml ~ ug/ml等表示。
線性http://www.dameics.com與范圍的確定可用作圖法(響應(yīng)值Y/濃度X)或計(jì)算回歸方程(Y=a+bX)來(lái)研究建立。
測(cè)定樣品時(shí)，所有生物藥物分析方法都必須同時(shí)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。每次作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，方法應(yīng)與分析方法考核時(shí)完全一致。標(biāo)準(zhǔn)濃度應(yīng)包括一定梯度的5-8個(gè)濃度 (非線性者如免疫分析可適當(dāng)增加)，每個(gè)濃度只需測(cè)定一次(免疫分析可測(cè)定兩次并取均值);標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)覆蓋樣品可能的濃度范圍，對(duì)于含量測(cè)定要求一般濃度上限為樣品最高濃度的120%，下限為樣品最低濃度的80% (但應(yīng)高于LOQ);目前仍廣泛采用相關(guān)系數(shù)(r)表示標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性度、并控制r≥0.9900。對(duì)照品的LOQ必須包括在線性范圍。
檢測(cè)限(limit of detection，LOD) 是指分析方法能夠從背景信號(hào)中區(qū)分出藥物時(shí)，所需樣品中藥物的最低濃度，無(wú)需定量測(cè)定。
LOD是一種限度檢驗(yàn)效能指標(biāo)，它既反映方法與儀器的靈敏度和噪音的大小，也表明樣品經(jīng)處理后空白(本底)值的高低。要根據(jù)采用的方法來(lái)確定檢測(cè)限。當(dāng)用儀器分析方法時(shí)，可用已知濃度的樣品與空白試驗(yàn)對(duì)照，記錄測(cè)得的被測(cè)藥物信號(hào)強(qiáng)度S與噪音(或背景信號(hào))強(qiáng)度
N，以能達(dá)到S/N=2或S/N=3時(shí)的樣品最低藥濃為L(zhǎng)OD;也可通過(guò)多次空白試驗(yàn)，求得其背景響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)差，將三倍空白標(biāo)準(zhǔn)差(即3δ空或3S空)作為檢測(cè)限的估計(jì)值。為使計(jì)算得到的LOD值與實(shí)際測(cè)得的LOD值一致，可應(yīng)用校正系數(shù)(f)來(lái)校正，然后依之制備相應(yīng)檢測(cè)限濃度的樣品，反復(fù)測(cè)試來(lái)確定LOD。如用非儀器分析方法時(shí)，即通過(guò)已知濃度的樣品分析來(lái)確定可檢出的最低水平作為檢測(cè)限。
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