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透析袋的預(yù)處理和保存
透析袋通常是由半透膜制成的袋狀容器,在生物大分子的制備過程中,除去鹽,少量有機(jī)溶劑,生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品時都要用到透析的技術(shù)透析袋。下面是小編整理的透析袋的預(yù)處理和保存,歡迎大家閱讀。
透析袋預(yù)處理方法
。1)將透析管剪成適當(dāng)長度,10-20cm的小段,即形成透析袋。
。2)在大體積2%(m/V)碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA(PH*8.0)中將透析袋煮沸10min。
。3)將透析袋用蒸餾水徹底漂洗。
。4)將透第一文庫網(wǎng)析袋置1mmol/L EDTA(PH*8.0)中煮沸10min。
(5)將透析袋冷卻,存放于4攝氏度,應(yīng)確保透析袋始終浸沒在液體中。重要:從此步起用透析袋時一定要帶手套操作。
。6)在使用前要用蒸餾水將透析袋里外加以清洗。
用過的透析袋保存前需要怎么處理?
用生理鹽水浸泡以去掉蛋白,并用蒸餾水清洗干凈,然后置50%乙醇中保存即可;用完以后,要徹底洗干凈,透析袋也可以保存在0.1%疊氮鈉(可防止微生物生長)里;0.05%-0.1%疊氮鈉,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存,公司的人建議前兩種保存比較好!
透析袋(別稱:透析膜)通常是由半透膜制成的袋狀容器。在生物大分子的制備過程中,除去鹽、少量有機(jī)溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品時都要用到透析的技術(shù)。
市面上的透析袋分兩種,透徹了解兩者的區(qū)別
1、濕型包裝:此款透析袋為即用型,不可煮,也不需要煮,只需用純水徹底沖洗即可;一般1米。
2、 干型包裝:此款透析袋為即用型,不可煮,也不需要煮,使用前用純水浸泡漂洗;一般5米。
區(qū)別:就在于干型需要組預(yù)處理,而即用型可以直接清洗后使用。所以能用干型可以盡可能用干型的,雖然略微復(fù)雜一些 但是真的性價比超高!
一、即用濕型透析袋的處理和使用方法:
特別提示:濕型透析袋的儲存液中含有0.05%疊氮鈉,使用者務(wù)必配帶手套操作!
1、儲存條件:
透析膜浸泡在儲存液中,封放置于 4-37 °C之間環(huán)境,有效期3年。
2、透析袋使用方法:
、侔淹肝龃舫蛇m當(dāng)長度(10cm-20 左右)的小段。
②用去離子水浸泡 10 分鐘左右,再用去離子水膜內(nèi)沖洗3次。
、鄄皇褂玫耐肝瞿し呕貎Υ嬉褐,密封保存,接觸透析膜過程中必須戴手套。
、苁褂脮r,一端用透析袋夾子夾緊,灌滿水后,用手指適當(dāng)加壓,檢查不漏,方可裝入樣品。通常要留三分之一至一半的空間,以防透析過程中,袋外的水和緩沖液過量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破。裝完樣品后,加樣端用夾子夾緊袋口,可在袋內(nèi)放一玻璃珠,以使透析袋處于懸浮狀態(tài),即可進(jìn)行透析(詳見透析袋裝置簡圖)。為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁力攪拌器。透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。
二、即用干型透析袋的處理和使用方法:
1、儲存條件:
干型透析膜表層涂有甘油保護(hù)層,封放置于 4-37 °C 之間環(huán)境,有效期5年,處理過的透析袋放置在透析袋儲存液中,4-37 °C 之間環(huán)境有效期3年。
2、透析袋使用方法:
、侔淹肝龃舫蛇m當(dāng)長度( 10cm左右)的小段。
、谟 60℃ 去離子水中水浴 30 分鐘-1小時,再用去離子水膜內(nèi)沖洗 3 次。
、凼褂脮r,一端用下沉透析袋夾子夾緊,灌滿水后,用手指適當(dāng)加壓,檢查不漏,方可裝入樣品。通常要留三分之一至一半的空間,以防透析過程中,袋外的水和緩沖液過量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破。裝完樣品后,用上浮夾子夾緊袋口,可在袋內(nèi)放一玻璃珠,以使透析袋處于懸浮狀態(tài),即可進(jìn)行透析(詳見透析袋裝置簡圖)。為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁力攪拌器。透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。
使用步驟:
a.把適量的透析液(緩沖液)加入透析裝置。透析液的體積應(yīng)為樣品體積量的 100 倍。(例如:在一升透析液中透析 10 毫升的樣品)
b.裁剪適當(dāng)長度的透析管。預(yù)留一段額外長度(約占總樣品體積量的 20%)作為頭部空間
c.把透析管插入打開的透析夾,在約超出透析夾 3-5 毫米的位置再夾住。不要折疊透析袋
d.由透析管開口端將樣品裝入。調(diào)整一下頂部空間的長度,夾緊透析夾
e.把透析樣品放在合適的透析緩沖液中
f.透析要根據(jù)具體的應(yīng)用需求。通常情況下,允許過夜透析。在持續(xù)透析的過程中,至少要進(jìn)行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時,6-8 小時和 10-14 小時(第 2 天早晨)更換透析液。在最后一次透析液的更換后要至少繼續(xù)進(jìn)行 2 小時的透析。
使用注意事項:
a. 透析袋不能在純水中長期儲存,會長菌,用1%苯甲酸鈉溶液儲存
b. 樣品按推薦的單位長度容量加樣,不可多加,樣品濃度不可太大,否則容易導(dǎo)致膜漲破
c. 樣品和透析液體積比一般是1:50~500
d. 對于高濃度污染物,樣品可能需要較長的時間透析,透析液需要更頻繁的更換。
e. 透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。濕型透析袋可以承受的溫度高達(dá) 37℃,干型透析袋可以承受的溫度高達(dá) 60℃。
f. 濕型透析袋或干型透析袋一旦變潮濕,不要讓透析袋干燥。不斷干燥會造成孔隙結(jié)構(gòu)不可恢復(fù)的倒塌。
透析膜和透析袋處理方法、使用后的保存方法
透析膜 (前處理方法如下):
1. 戴手套把透析膜剪成適當(dāng)長度,浸在蒸餾水中 15 min 泡軟。
2. 浸入10 mM 碳酸氫鈉(sodium bicarbonate)中,并加熱至80℃,一邊攪拌至少 30 min。
3. 換到10 mM Na2EDTA中浸泡 30 min,以新鮮的 EDTA 同樣方法處理三次。
4. 再用80℃蒸餾水洗30 min,然后換到20%酒精中,放在4℃冰箱中保存。
使用前處理:
1. 把透析袋剪成適當(dāng)長度(10-20cm)的小段。
2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。
3. 用蒸餾水*清洗透析袋里外。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。
5. 冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時起取用透析袋是必須戴手套。
6. 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出,將之清洗干凈。
透析袋的物理學(xué)抗力:
透析袋由再生纖維素構(gòu)成,可以煮沸或消毒。 一旦已呈濕狀即不可再*干躁,除非用甘油重處理。內(nèi)含有液體的透析袋可冷凍。另外:透析袋的生物學(xué)抗力決定著透析袋的保存
透析袋使用后保存:
透析袋對于纖維素活性是敏感的,尤其在濕狀時?梢员苊馊芾w維素的微生物生長,通過將透析袋保存在4°C含有0.05 % 疊氮鈉(sodium azide)溶液, 或 4°C含有20 % 乙醇溶液,也可保存在50 % 甘油(glycerol)溶液。
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