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白蛋白檢測(cè)方法是什么
白蛋白是我們體內(nèi)的一種營養(yǎng)值,如果白蛋白出現(xiàn)了問題,可能會(huì)對(duì)于我們自身的生理機(jī)能都會(huì)產(chǎn)生很大的負(fù)面影響,所以我們?nèi)粘R欢ㄒ⒁庾约旱娘嬍骋鹛貏e的高度重視,注意自己的營養(yǎng)均衡,了解一下白蛋白檢測(cè)方法可以幫助我們盡快尋求解決方法。
一、微量凱氏(kjeldahl)定氮法
樣品與濃硫酸共熱。含氮有機(jī)物即分解產(chǎn)生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸氨。經(jīng)強(qiáng)堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據(jù)此酸液被中和的程度可計(jì)算得樣品之氮含量。若以甘氨酸為例,其反應(yīng)式如下:
nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so2+4h2o+nh3 (1)
2nh3+h2so4——(nh4)2so4 (2)
(nh4)2so4+2naoh——2h2o+na2so4+2nh3 (3)
反應(yīng)(1)、(2)在凱氏瓶內(nèi)完成,反應(yīng)(3)在凱氏蒸餾裝置中進(jìn)行。
為了加速消化,可以加入cuso4作催化劑,k2so4以提高溶液的沸點(diǎn)。收集氨可用硼酸溶液,滴定則用強(qiáng)酸。實(shí)驗(yàn)和計(jì)算方法這里從略。
計(jì)算所得結(jié)果為樣品總氮量,如欲求得 樣品中蛋白含量,應(yīng)將總氮量減去非蛋白
氮即得。如欲進(jìn)一步求得樣品中蛋白質(zhì)的含量,即用樣品中蛋白氮乘以6.25即得。
二、雙縮脲法(biuret法)
(一)實(shí)驗(yàn)原理
雙縮脲(nh3conhconh3)是兩個(gè)分子脲經(jīng)180℃左右加熱,放出一個(gè)分子氨后得到的產(chǎn)物。在強(qiáng)堿性溶液中,雙縮脲與cuso4形成紫色絡(luò)合物,稱為雙縮脲反應(yīng)。凡具有兩個(gè)酰胺基或兩個(gè)直接連接的肽鍵,或能過一個(gè)中間碳原子相連的肽鍵,這類化合物都有雙縮脲反應(yīng)。
紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān),故可用來測(cè)定蛋白質(zhì)含量。測(cè)定范圍為1-10mg蛋白質(zhì)。干擾這一測(cè)定的物質(zhì)主要有:硫酸銨、tris緩沖液和某些氨基酸等。
了解了白蛋白檢測(cè)方法才能夠在第一時(shí)間內(nèi)判斷我們自身是不是出現(xiàn)了類似的問題,以便我們采取針對(duì)性的方法進(jìn)行治療,白蛋白的情況日常一定要增強(qiáng)體育鍛煉可以大大提高我們自身的免疫力和抵抗力,可以減少這種疾病對(duì)我們自身的侵襲。
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