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GST-hDSL重組蛋白的原核表達(dá)純化及對(duì)人造血祖細(xì)胞的擴(kuò)增作用
目的:原核表達(dá)DSL與谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GST)的融合蛋白并研究觀察GST-hDSL對(duì)人臍帶血CD34+造血祖細(xì)胞的體外擴(kuò)增作用.方法:將人DSL cDNA的蛋白編碼序列克隆入原核表達(dá)載體pGEX-2T中,在大腸桿菌DH5α中誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白,用DEAE陰離子交換柱純化目的蛋白.然后分離、純化臍帶血CD34+造血祖細(xì)胞,不加細(xì)胞因子或加入SCF(干細(xì)胞生長(zhǎng)因子,stem cell factor)和GM-CSF(粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子,granuloeyte-macrophage colony-stimulating factor),經(jīng)過(guò)14天的培養(yǎng),檢測(cè)GST-hDSL對(duì)細(xì)胞總數(shù)、CD34+細(xì)胞百分率、以及集落形成的影響.結(jié)果:當(dāng)SCF和GM-CSF存在時(shí),GST-hDSL組的CD34+細(xì)胞百分率,集落(colony forming cells,CFC)數(shù)以及高增值潛能集落(high proliferative potential colony forming cells,HPP-CFC)數(shù)分別是時(shí)照組的1.9、1.2、5.3倍.結(jié)論:當(dāng)與SCF和GM-CSF聯(lián)合作用時(shí),重組GST-hDSL蛋白對(duì)造血祖細(xì)胞具有擴(kuò)增作用.
作 者： 林小娟 黃薇薇 趙梅 姜俊芬 郭凌晨 吳明媛 韓偉 LIN Xiao-Juan HUANG Wei-Wei ZHAO Mei JIANG Juan-Fen GUO Ling-Chen WU Ming-Yuan HAN Wei 作者單位： 刊 名： 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展 ISTIC 英文刊名： PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年，卷(期)： 2008 8(4) 分類(lèi)號(hào)： Q291 關(guān)鍵詞： GST-hDSL Notch通路 造血祖細(xì)胞【GST-hDSL重組蛋白的原核表達(dá)純化及對(duì)人造血祖細(xì)胞的擴(kuò)增作用】相關(guān)文章：
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