米曲霉堿性蛋白酶基因的前導區(qū)對其在畢赤酵母中表達的必要性

為探討前導區(qū)對米曲霉堿性蛋白酶基因在畢赤酵母中表達的必要性,本試驗首先將米曲霉堿性蛋白酶的成熟肽編碼基因(alp-m)和表達載體pPIC9K雙酶切后連接,得到重組表達載體pPIC9K/alp-m.然后將其線性化后電轉(zhuǎn)化畢赤酵母GS115.篩選陽性轉(zhuǎn)化子進行甲醇誘導表達,并進行SDS-PAGE分析和堿性蛋白酶活力測定,同時在轉(zhuǎn)錄水平上對目的基因進行了Northern blot檢測.將得到的結(jié)果與以前研究中得到的帶有前導區(qū)的米曲霉堿性蛋白酶成熟肽基因在畢赤酵母中的表達結(jié)果進行對比.結(jié)果表明:如果沒有前導區(qū),米曲霉堿性蛋白酶成熟肽基因在畢赤酵母中表達,無論在胞內(nèi)和胞外均檢測不到目的蛋白.由此可見,米曲霉堿性蛋白酶基因在畢赤酵母中表達時必須有前導區(qū)的參與.

作 者： 郭繼平 馬光 馬鶯 GUO Ji-ping MA Guang MA Ying   作者單位： 郭繼平,馬鶯,GUO Ji-ping,MA Ying(哈爾濱工業(yè)大學,食品科學與工程學院,哈爾濱,150086)

馬光,MA Guang(東北林業(yè)大學,生命科學學院,哈爾濱,150040) 

刊 名： 上海交通大學學報（農(nóng)業(yè)科學版）  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)  年，卷(期)： 2008 26(3)  分類號： Q786  關鍵詞： 米曲霉堿性蛋白酶基因   前導區(qū)   畢赤酵母   異源表達  

【米曲霉堿性蛋白酶基因的前導區(qū)對其在畢赤酵母中表達的必要性】相關文章：

酵母菌的作用09-19

愛在濃濃米香中作文10-19

運動會班級前導詞09-26

詩歌中的表達技巧教案09-25

軍訓畢訓總結(jié)09-24

赤竺丹花作文12-11

關于英雄的作文：赤，英雄02-20

高中運動會班級前導詞范文09-26

如何分辨酸堿性食物？09-27

《修其德與運其智》體育教案08-26