新城疫病毒F和HN蛋白的原核表達

目的:高水平表達新城疫病毒(Newcastle Disease Virus, NDV)標準強毒F48E8株的F基因和HN基因.方法:利用PCR方法擴增出新城疫病毒(Newcastle Disease Virus, NDV)標準強毒F48E8株的去掉N端信號肽和C端跨膜區(qū)的F基因和HN基因并將其克隆到原核表達載pET30a上,得到重組質(zhì)粒rpET30a-NDV/F和rpET30a-NDV/HN,轉(zhuǎn)化到受體菌Rosetta-gamiTM2感受態(tài)細胞中,經(jīng)IPTG誘導表達,SDS-PAGE電泳和Western blot檢測.結果:表達的F蛋白大小約為40kD,HN蛋白大小約為51kD左右,符合預期結果.Western blot分析表明,能與抗His-tag單克隆抗體發(fā)生特異性反應.結論:重組蛋白在原核表達系統(tǒng)內(nèi)得到了高水平的表達.說明了去除F和HN基因N端信號肽和C端跨膜區(qū)的必要性.

作 者： 冉旭華 聞曉波 趙喜紅 劉長鳳 RAN Xu-hua WEN Xiao-bo ZHAO Xi-hong LIU Chang-feng   作者單位： 黑龍江八一農(nóng)墾大學動物科技學院,黑龍江大慶,163319  刊 名： 生物技術  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 18(3)  分類號： Q786  關鍵詞： 新城疫病毒(NDV)   F蛋白   HN蛋白   原核表達  

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