人工合成草魚生長激素cDNA在大腸桿菌中的表達

經(jīng)密碼子優(yōu)化的人工合成草魚生長激素cDNA與表達載體pET-28a(+)重組，構(gòu)建重組表達質(zhì)粒pET-GH。轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)，篩選陽性克隆，IPTG誘導表達。12.5％的SDS-PAGE分析顯示，大腸桿菌表達產(chǎn)物中含有與草魚生長激素分子量一致的新增蛋白帶，激光密度掃描，其產(chǎn)量約占菌體總蛋白的40％。金屬離子螯合層析柱親和純化，獲得電泳純的重組蛋白。Western-blotting和酶聯(lián)免疫吸附受體法檢測證實：重組蛋白與抗草魚生長激素的多克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合；復性后的重組蛋白有與天然草魚生長激素一致的生物學活性。

作 者： 王偉 汪亞平 朱作言 WANG Wei WANG Ya-Ping ZHU Zuo-Yan   作者單位： 中國科學院水生生物研究所,  刊 名： 遺傳學報  ISTIC SCI PKU 英文刊名： ACTA CENETICA SINICA  年，卷(期)： 2001 28(4)  分類號： Q95  關鍵詞： 草魚生長激素   原核表達   純化   酶聯(lián)免疫吸附受體檢測  

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