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用一個(gè)簡(jiǎn)單快速的RT-PCR技術(shù)篩選白細(xì)胞介素－6作用相關(guān)基因
為了研究白細(xì)胞介素-6(IL-6)作用相關(guān)基因以及一些可能受IL-6調(diào)控的基因，利用一個(gè)簡(jiǎn)單快速的以PCR為基礎(chǔ)的方案，檢測(cè)了IL-6處理和未處理的Sko007細(xì)胞中基因表達(dá)的差異，克隆并鑒定了差異表達(dá)基因的cDNA片段.首先用6-mer寡核苷酸引物進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄從而最大限度地將mRNA編碼區(qū)序列生成cDNA；然后用2或3個(gè)較長(zhǎng)的隨機(jī)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并以不同引物組合重復(fù)PCR增擴(kuò)；擴(kuò)增產(chǎn)物在2%瓊脂糖凝膠上電泳分離，回收差異片段并直接用于克隆、測(cè)序及進(jìn)一步分析.在此研究中，獲得了3個(gè)表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)，其中一個(gè)為新的基因片段，反向RNA雜交有力證實(shí)了它們與IL-6作用的相關(guān)性.進(jìn)一步的生物信息學(xué)分析表明，新基因片段STRF17在多種組織中表達(dá).
作 者： 黃耀江 王關(guān)林 黎燕 施明 王建安 胡美茹 沈倍奮 作者單位： 黃耀江,王關(guān)林(大連理工大學(xué)生化工程研究所,)黎燕,施明,王建安,胡美茹,沈倍奮(北京基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所,)
刊 名： 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展 ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年，卷(期)： 2001 28(4) 分類號(hào)： Q939 關(guān)鍵詞： 白細(xì)胞介素-6 差異表達(dá)基因 骨髓瘤細(xì)胞【用一個(gè)簡(jiǎn)單快速的RT-PCR技術(shù)篩選白細(xì)胞介素－6作用相關(guān)基因】相關(guān)文章：
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