大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng)條件的優(yōu)化研究

目的:建立和優(yōu)化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分離培養(yǎng)條件,以獲得群體均一、未分化狀態(tài)保持良好的MSCs.方法:收集不同周齡大鼠骨髓細(xì)胞;以不同濃度Percoll密度梯度離心分離骨髓單個核細(xì)胞;以60%低糖DMEM40%MCDB201為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,培養(yǎng)24h去懸浮細(xì)胞;以不同接種密度傳代培養(yǎng);堿性磷酸酶染色和油紅O染色考察MSCs向骨和脂肪組織分化的潛能.結(jié)果:采用57%Percoll液的分離效果優(yōu)于70%Percoll液.6周齡(體重約180g)大鼠能在細(xì)胞分離的質(zhì)和量上達(dá)到最佳效果.24h進(jìn)行懸浮細(xì)胞去除、5×103/cm2接種密度傳代培養(yǎng),光鏡和電鏡顯示MSCs增殖能力強(qiáng),功能狀態(tài)活躍,成脂成骨實(shí)驗(yàn)顯示多向分化潛能保持良好.結(jié)論:優(yōu)化大鼠周齡、分離液的密度、細(xì)胞培養(yǎng)條件及改進(jìn)培養(yǎng)方法有助于獲得多向分化潛能保持良好的均一的MSCs.

作 者： 晏丹 舒賽男 YAN Dan SHU Sai-nan   作者單位： 晏丹,YAN Dan(武漢科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理教研室,湖北,武漢,430065)

舒賽男,SHU Sai-nan(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院兒科,湖北,武漢,430030) 

刊 名： 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展  ISTIC 英文刊名： PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE  年，卷(期)： 2008 8(1)  分類號： Q813.1  關(guān)鍵詞： 間充質(zhì)干細(xì)胞   分離   培養(yǎng)   優(yōu)化  

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