灌流-液壓式反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化軟骨

目的 初步探討應(yīng)用灌流-液壓式反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化軟骨的可行性及其效果.方法 消化、分離豬耳廓軟骨細(xì)胞,接種于聚羥基乙酸支架上培養(yǎng)1周,形成細(xì)胞-支架復(fù)合物.實(shí)驗(yàn)分2組(每組8個(gè)樣本):實(shí)驗(yàn)組放入灌流-液壓式反應(yīng)器連續(xù)培養(yǎng)3周;反應(yīng)器主要參數(shù)設(shè)置:灌流量100 μL/min,順、逆時(shí)針?lè)较蚋?0 min,灌流時(shí)間開(kāi)/關(guān)各8 h/16 h,液壓強(qiáng)度100 kPa,頻率0.5 Hz,作用時(shí)間4 h/d.對(duì)照組則繼續(xù)在培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng).第4周時(shí)取材,分別從大體、組織學(xué)、Ⅱ型膠原免疫組化和生物化學(xué)等方面對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組形成的軟骨組織進(jìn)行檢測(cè)和比較.結(jié)果 大體觀察見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均形成了軟骨樣組織,組織濕重檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組為(191.03±18.55)mg,對(duì)照組為(130.78±10.33)mg(P＜0.01).組織學(xué)觀察顯示,兩組軟骨組織內(nèi)軟骨細(xì)胞分布均勻,包埋于軟骨陷窩內(nèi),軟骨基質(zhì)分泌旺盛,局部還有未降解的支架材料.免疫組化染色證實(shí)兩組形成的軟骨組織均有Ⅱ型膠原分布,軟骨組織厚度實(shí)驗(yàn)組為(3.04±0.13)mm,對(duì)照組為(2.14±0.16)mm,兩組間比較有顯著性差異(P＜0.01).生物化學(xué)檢測(cè)證實(shí),實(shí)驗(yàn)組蛋白聚糖含量為(12.63±0.62)mg/g,明顯高于對(duì)照組的(8.23±0.81)mg/g(P＜0.01).結(jié)論 利用灌流-液壓式反應(yīng)器能夠在體外構(gòu)建組織工程化軟骨,并且可以在一定程度上彌補(bǔ)傳統(tǒng)構(gòu)建方法的不足,提高體外構(gòu)建軟骨的質(zhì)量.

作 者： 呂曉杰 周廣東 李宏 曹琿 劉霞 劉凱 崔磊 劉偉 曹誼林 LU Xiao-jie ZHOU Guang-dong LI Hong CAO Hui LIU Xia LIU Kai CUI Lei LIU Wei CAO Yi-lin   作者單位： 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第九人民醫(yī)院整復(fù)外科,上海市組織工程研究與開(kāi)發(fā)中心,上海,200235  刊 名： 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)  年，卷(期)： 2006 26(9)  分類號(hào)： Q813.11  關(guān)鍵詞： 灌流-液壓式反應(yīng)器   軟骨細(xì)胞   組織工程   體外構(gòu)建  

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