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吸水鏈霉菌17997格爾德霉素部分生物合成基因簇的克隆和分析

時(shí)間:2023-05-03 00:57:45 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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吸水鏈霉菌17997格爾德霉素部分生物合成基因簇的克隆和分析

吸水鏈霉菌17997 (Streptomyces hygroscopicus 17997) 是我所從中國(guó)云南土壤中分離到的格爾德霉素(geldanamycin, GDM)產(chǎn)生菌,GDM具有良好的抗腫瘤和抗病毒活性,但其肝毒性和水溶性差的缺點(diǎn)限制了其在臨床上的應(yīng)用.為了實(shí)現(xiàn)對(duì)GDM結(jié)構(gòu)的生物學(xué)改造,首先要獲得GDM的生物合成基因.根據(jù)GDM后修飾基因--氨甲;D(zhuǎn)移酶基因(gdmN)的保守序列篩選S. hygroscopicus 17997的柯斯質(zhì);蚪M文庫(kù),共獲得6個(gè)陽(yáng)性克隆,選擇CT-4陽(yáng)性柯斯質(zhì)粒進(jìn)行亞克隆和測(cè)序,又通過(guò)PCR延伸的方法獲得了與CT4連鎖的將近5kb的外源序列,共獲得28.356kb 的外源DNA序列,其中包含了13個(gè)可能閱讀框架,通過(guò)同源比較證實(shí)該序列與S. hygroscopicusNRRL 3602中的GDM生物合成基因有很高的同源性.為進(jìn)一步研究GDM生物合成基因的功能,并通過(guò)組合生物學(xué)的方法改造GDM的結(jié)構(gòu)奠定了基礎(chǔ).

吸水鏈霉菌17997格爾德霉素部分生物合成基因簇的克隆和分析

作 者: 赫衛(wèi)清 王以光 HE Wei-Qing WANG Yi-Guang   作者單位: 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院/中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)醫(yī)藥生物技術(shù)研究所,北京,100050  刊 名: 生物工程學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年,卷(期): 2006 22(6)  分類號(hào): Q93  關(guān)鍵詞: 吸水鏈霉菌17997   格爾德霉素(geldanamycin,GDM)   氨甲;D(zhuǎn)移酶基因   生物合成基因簇  

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