粉塵螨Ⅰ類變應(yīng)原(Der fⅠ)的克隆表達(dá)、純化及免疫學(xué)特性

時(shí)間：2023-05-02 08:45:56 生物醫(yī)學(xué)論文我要投稿

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粉塵螨Ⅰ類變應(yīng)原(Der fⅠ)是粉塵螨Dermatophagoides farinae主要變應(yīng)原,可引發(fā)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng).挑取純培養(yǎng)的粉塵螨,提取總RNA,采用RT-PCR方法有效地?cái)U(kuò)增出DerfⅠ片段,產(chǎn)物連接入T載體(pMD18).經(jīng)擴(kuò)增后,用Nde Ⅰ和XhoⅠ雙酶切后將目的片段連接到pET24a表達(dá)載體上,得到重組質(zhì)粒pET24a-DerfⅠ,工程菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)培養(yǎng),高效表達(dá)出DerfⅠ蛋白,該蛋白主要以包涵體形式存在.表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)親和層析純化,用Western blot及ELISA方法檢測(cè)免疫學(xué)活性,結(jié)果表明目的蛋白具有良好的免疫原性.

作者：朱健琦劉志剛高波吉坤美邢苗 ZHU Jian-Qi LIU Zhi-Gang GAO Bo JI Kun-Mei XING Miao 作者單位：朱健琦,高波,ZHU Jian-Qi,GAO Bo(深圳大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,廣東,深圳,518060)

劉志剛,邢苗,LIU Zhi-Gang,XING Miao(深圳大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,廣東,深圳,518060;深圳市微生物基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東,深圳,518060)

吉坤美,JI Kun-Mei(深圳市微生物基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東,深圳,518060)

刊名：昆蟲(chóng)學(xué)報(bào) ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ENTOMOLOGICA SINICA 年，卷(期)： 2006 49(2) 分類號(hào)： Q966 關(guān)鍵詞：粉塵螨變應(yīng)原表達(dá) 純化特性鑒定

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