豬鏈球菌2型溶血素基因與38KDa蛋白基因克隆及聯(lián)合表達

目的:研究有效的豬鏈球菌病疫苗.方法:以四川株豬鏈球菌2型基因組DNA為模板分別擴增溶血素基因和38KDa基因主要功能區(qū)基因;并經(jīng)連接、克隆及酶切鑒定.分別構(gòu)建原核表達栽體pET32a-Sly、pET32a-38KDa,提取陽性克隆質(zhì)粒分別進行雙酶切并純化,通過PCR串聯(lián)兩片斷,將目的片斷定向克隆到表達載體pET32a中,經(jīng)測序正確后,重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21(DE3),用IPTG進行誘導表達.結(jié)果:重組菌菌體裂解物經(jīng)SDS-PAGE電泳可檢測到相對分子量約為60Ku的重組蛋白,表達產(chǎn)物經(jīng)純化后,免疫印跡法(Western-blotting)證實該重組蛋白可以與SS2陽性血清發(fā)生特異性反應.結(jié)論:本研究為重組蛋白的免疫保護應用奠定基礎.

作 者： 王華 王君瑋 陳義平 趙永剛 徐天剛 趙云玲 張維 王志亮 WANG Hua WANG Jun-wei CHEN Yi-ping ZHAO yong-gang XU Tian-gang ZHAO Yun-ling ZHANG Wei WANG Zhi-liang   作者單位： 王華,WANG Hua(中國動物衛(wèi)生流行病學中心ABSL-3實驗室,青島,266114;揚州大學獸醫(yī)學院,揚州,225009)

王君瑋,陳義平,趙永剛,徐天剛,趙云玲,張維,王志亮,WANG Jun-wei,CHEN Yi-ping,ZHAO yong-gang,XU Tian-gang,ZHAO Yun-ling,ZHANG Wei,WANG Zhi-liang(中國動物衛(wèi)生流行病學中心ABSL-3實驗室,青島,266114) 

刊 名： 現(xiàn)代生物醫(yī)學進展  ISTIC 英文刊名： PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE  年，卷(期)： 2007 7(7)  分類號： Q813  關(guān)鍵詞： 豬鏈球菌2型   溶血素   38KDa蛋白   克隆   表達  

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