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轉(zhuǎn)擬南芥AtKup1基因高含鉀量煙草獲得

時(shí)間:2023-04-27 21:33:15 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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轉(zhuǎn)擬南芥AtKup1基因高含鉀量煙草獲得

提取擬南芥幼根總RNA,進(jìn)行RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄,產(chǎn)物測序,將其構(gòu)建到含Km(帶內(nèi)含子)篩選標(biāo)記的植物雙元表達(dá)載體上,根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將AtKup1基因?qū)霟煵?對轉(zhuǎn)化子進(jìn)行PCR擴(kuò)增、GUS染色、Southern雜交和AtKup1基因mRNA熒光定量PCR分析,并進(jìn)行煙葉內(nèi)在成分化驗(yàn)分析.PCR獲得2100bp左右擴(kuò)增產(chǎn)物,測序結(jié)果證實(shí)擴(kuò)增產(chǎn)物序列與擬南芥AtKup1基因(Genbank No:AF029876)一致;得到GUS染色陽性的AtKup1基因轉(zhuǎn)化煙草材料29株.經(jīng)PCR擴(kuò)增、分子雜交檢測證實(shí)AtKup1基因已整合到轉(zhuǎn)基因煙草的基因組,熒光定量PCR分析可以在幼根中檢測到AtKup1基因的mRNA轉(zhuǎn)錄.煙葉含鉀量化驗(yàn)結(jié)果表明導(dǎo)入的AtKup1基因在轉(zhuǎn)化材料中成功表達(dá),使煙葉含鉀量提高約45%.

作 者: 郭兆奎 楊謙 姚泉洪 萬秀清 顏培強(qiáng) GUO Zhao-kui YANG Qian YAO Quan-hong WAN Xiu-qing YAN Pei-qiang   作者單位: 郭兆奎,楊謙,GUO Zhao-kui,YANG Qian(哈爾濱工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與工程系,哈爾濱,150001)

姚泉洪,YAO Quan-hong(上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)中心,上海,201106)

萬秀清,顏培強(qiáng),WAN Xiu-qing,YAN Pei-qiang(黑龍江省煙草科學(xué)研究所,牡丹江,157011) 

刊 名: 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名: CHINA BIOTECHNOLOGY  年,卷(期): 2005 25(12)  分類號: Q81  關(guān)鍵詞: AtKup1基因   轉(zhuǎn)基因煙草   K+含量  

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