不同方法測(cè)定黃嘌呤對(duì)Bacillus fastidiosus胞外尿酸酶抑制效力的比較

篩選酶抑制劑常需測(cè)定米氏常數(shù)(Km)和最大反應(yīng)速度(Vm)來(lái)確定抑制常數(shù)(Ki)[1,2].雙倒數(shù)分析法測(cè)定Ki效率低,且靶酶Km越高則成本越高.積分法[3,4]和線性動(dòng)力學(xué)法[5,6]測(cè)定Ki所需底物濃度都高于Km,至今對(duì)高Km靶酶都測(cè)定極低底物濃度下的半抑制濃度,或再換算成抑制常數(shù)表示抑制效力.但測(cè)定低濃度底物下的初速度要求高靈敏度的定量方法.實(shí)際上在低濃度底物下用簡(jiǎn)化積分法也可測(cè)定Ki[7].Bacillusfastidiosus胞外尿酸酶Km接近0.2 mmol/L,黃嘌呤是其競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑[4～6].本文用低濃度尿酸,比較測(cè)定初速度確定黃嘌呤半抑制濃度和簡(jiǎn)化積分法測(cè)定黃嘌呤抑制常數(shù)的差異.

作 者： 趙利娜 趙運(yùn)勝 陶佳 廖飛   作者單位： 重慶醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室,重慶,400016  刊 名： 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF CHONGQING MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 31(3)  分類號(hào)： Q55 Q555.8  關(guān)鍵詞：  

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