人紅細(xì)胞血型糖蛋白GYPC的克隆與表達(dá)

目的:克隆人紅細(xì)胞血型糖蛋白C(GYPC)基因,構(gòu)建GYPC重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,以獲得穩(wěn)定表達(dá)GYPC的L929細(xì)胞.方法:RT-PCR擴(kuò)增入GYPC基因,克隆入T載體后,將GYPC雙酶切亞克隆入逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pEGZ,用此重組載體轉(zhuǎn)染L929細(xì)胞,Zeocin篩選得到陽(yáng)性克隆;用RTPCR及流式細(xì)胞術(shù)等方法對(duì)重組載體進(jìn)行鑒定.結(jié)果:克隆了人GYPC基因,并獲得穩(wěn)定表達(dá)GYPC的L929細(xì)胞系.結(jié)論:應(yīng)用基因工程技術(shù),成功構(gòu)建了含人GYPC基因重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體和穩(wěn)定表達(dá)人GYPC的細(xì)胞株,建立了紅細(xì)胞血型抗原的異源表達(dá)系統(tǒng),為血清中抗GYPC特異性抗體的檢測(cè)及GYPC單克隆抗體的制備和研究奠定了基礎(chǔ).

作 者： 陳琦 洪光 劉進(jìn) 李厚達(dá)   作者單位： 陳琦(揚(yáng)州大學(xué),醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室,江蘇,揚(yáng)州,225001;揚(yáng)州大學(xué),比較醫(yī)學(xué)中心,江蘇,揚(yáng)州,225001)

洪光,劉進(jìn),李厚達(dá)(揚(yáng)州大學(xué),比較醫(yī)學(xué)中心,江蘇,揚(yáng)州,225001) 

刊 名： 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(3)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： 血型糖蛋白C   逆轉(zhuǎn)錄病毒   轉(zhuǎn)染   基因表達(dá)  

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