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野生桃幼葉DNA提取方法的改良研究
以野生桃幼葉為材料,為適應(yīng)AFLP分析要求,對常規(guī)SDS法、CTAB法、SDS-CTAB結(jié)合法以及改良CTAB法等4種基因組總DNA的提取方法的效果進行了比較研究.結(jié)果表明,常規(guī)SDS法難以去除桃幼葉組織中的蛋白質(zhì)、多糖和酚類等雜質(zhì),使所提取的DNA呈黏稠狀的淺褐色沉淀,難以溶解;CTAB法和SDS-CTAB結(jié)合法提取的桃基因組DNA,雖然蛋白質(zhì)和酚類等雜質(zhì)去除較干凈,但對多糖類物質(zhì)的去除能力仍然有限,且提取效果在品種間重復(fù)性較差;而改良CTAB法提取DNA完整性較好,雜質(zhì)少,無降解現(xiàn)象,RNA去除干凈,能被限制性內(nèi)切酶完全消化,通過基因組DNA-AFLP指紋圖譜分析,完全滿足實驗要求.
作 者: 王富榮 佟兆國 章鎮(zhèn) 陳清華 姜立杰 趙劍波 作者單位: 王富榮,佟兆國,章鎮(zhèn)(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,江蘇,南京,210095)陳清華,姜立杰,趙劍波(北京市農(nóng)林科學(xué)院林業(yè)果樹研究所,北京,100093)
刊 名: 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) ISTIC PKU 英文刊名: JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES 年,卷(期): 2006 ""(5) 分類號: S662.1 關(guān)鍵詞: AFLP 桃 DNA提取